La première partie de "Durée de vie de la colonne" traite de la manipulation générale d'une colonne HPLC, en évitant les obstructions dues aux particules et à la cristallisation. La deuxième partie explique d'autres facteurs qui peuvent contribuer à la longévité de la colonne.

1. Utilisation d'une forte teneur en eau

La plupart des colonnes en phase inversée (RP) ne sont pas compatibles avec des conditions 100 % aqueuses, en raison du déshydratation des pores. Ce phénomène se produit lorsque la pression est retirée du système, ce qui entraîne l'expulsion de l'eau du réseau de pores hydrophobes. Cela entraîne une perte de temps de rétention et une mauvaise reproductibilité. Pour éviter cette situation, assurez-vous de suivre les recommandations du fabricant concernant la teneur minimale en organique dans la phase mobile, ou ne retirez pas la pression du système avant d'ajouter un solvant organique à la phase stationnaire.

Si vous souhaitez toujours travailler avec une très forte teneur en eau, des colonnes spéciales peuvent être utilisées, souvent marquées par l'abréviation AQ.

2. Stockage de la colonne

Il est généralement sûr d'utiliser la même solution de stockage que celle utilisée pour l'expédition de la colonne (voir les instructions du fabricant). Un solvant de stockage typique pour une colonne RP est une solution 50:50 v/v Eau:Acétonitrile.
Conservez un enregistrement de la solution de stockage et des conditions d'utilisation finales avec la colonne.
Vissez un bouchon hermétique à l'extrémité de la colonne. Ne laissez pas les matériaux de remplissage se dessécher !
Rangez la colonne dans un endroit où elle n'est pas soumise à des chocs ou à des fluctuations de température soudaines.

3. Colonne et précolonne défectueuses

La figure de droite montre un chromatogramme d'une nouvelle colonne comparé à un chromatogramme d'une colonne plus ancienne. Dans la colonne plus ancienne, vous pouvez voir un fronting significatif de tous les pics.

Pour obtenir une bonne idée de la performance de la colonne, vous pouvez reproduire les mêmes conditions analytiques que dans les tests fournies avec la colonne et les comparer avec le chromatogramme obtenu. Si une précolonne est utilisée, elle doit être retirée et l'analyse répétée.

Comme mentionné dans les deux dernières parties, certaines précautions peuvent être prises pour assurer la plus longue durée de vie possible de la colonne.

Dans le module à venir, nous traiterons du sujet des détecteurs.

Votre équipe Shimadzu LC