Analyse par lots du tryptophane et de ses métabolites
L’analyse par lots de métabolites dans des échantillons biologiques par HPLC nécessite normalement plusieurs dizaines de minutes. Cependant, la HPLC à grande vitesse et à séparation élevée utilisant un tassement de particules ultrafines, qui s'est récemment généralisée, peut réduire le temps d'analyse d'au moins un cinquième.
L’analyse par lots de métabolites avec un système de chromatographe liquide ultrarapide Prominence UFLC utilisant du tryptophane est décrite ci-dessous.
Le tryptophane est connu pour avoir deux voies métaboliques, la kynurénine et la sérotonine. Le tryptophane et 16 composants métaboliques majeurs, dont la kynurénine et la sérotonine, ont été analysés par lots à l'aide d'une colonne Shim-pack XR-ODS à grande vitesse et à haute séparation. L'analyse par lots des composants pourrait être réalisée en environ six minutes dans ces conditions analytiques. La pression de la colonne pour cette analyse était d'environ 25 MPa.
Un détecteur à réseau de photodiodes et un détecteur spectrofluorométrique ont été connectés en série pour cette analyse. La fluorescence naturelle des composés à squelette indole permet une détection avec une sensibilité et une sélectivité plus élevées.
Chromatogramme de 16 composants métabolites du tryptophane (en haut : détecteur UV ; en bas : détecteur à fluorescence)
Chromatographe liquide ultrarapide Prominence UFLC
Ce système offre une analyse ultra-rapide. Il réduit le temps d'analyse à seulement 10 % par rapport à la LC conventionnelle et réduit le cycle d'analyse total. Il offre une analyse haute résolution qui atteint trois fois la résolution de la LC générale. La colonne Shim-pack XR-ODS haute vitesse et haute séparation maximise les performances du Prominence UFLC.