A propos de la résolution, Part 1
Qu'est-ce que la chromatographie multidimensionnelle ?
La chromatographie multidimensionnelle utilise une combinaison de plusieurs techniques de chromatographie, modes de séparation et colonnes pour séparer plusieurs composants. Elle atteint une séparation significativement plus élevée que la chromatographie unidimensionnelle normale. Divers modes de séparation et les phases mobiles correspondantes peuvent être sélectionnés pour l'HPLC, et les diverses permutations disponibles suggèrent la possibilité d'atteindre un degré de sélectivité impossible à obtenir uniquement avec une séparation unidimensionnelle.
L'équation (1) indique que la résolution est la différence entre les temps de rétention des pics divisée par la largeur moyenne des pics. Dans un pic avec une distribution gaussienne, la largeur du pic est W = 4 σ (où σ est l'écart type) et la FWHM du pic est W0.5h = 2.354σ. En substituant ces relations dans l'équation (1), on obtient les résultats dans l'équation (2).
Résolution et séparation des pics
La résolution est représentée par une valeur numérique, telle que 0,8, 1,0 ou 3,0. Mais quelle est la relation entre le nombre représentant la résolution et la séparation réelle des pics ? À une résolution de 1,0, si l'on suppose que les deux pics ont une distribution gaussienne et ont la même hauteur et largeur de pic, alors la différence de temps de rétention de l'équation (1) devient 1,0W, soit 1,0 × 4σ = 4 σ. Dans le cas d'une distribution gaussienne, 4 σ englobe 95,4 %, de sorte que les pics se chevauchent de 2,3 % ((100 % - 95,4 %)/2). Cela indique que 2,3 % du pic pénètre dans l'autre pic à partir d'une ligne perpendiculaire tracée dans le creux. De même, une résolution de 1,5 indique une différence de temps de rétention de 1,5× 4σ = 6σ, ce qui correspond à un chevauchement de 0,15 % ((100 % - 99,7 %)/2). Voir Fig. 2.
Résolution et facteur de séparation, facteur de rétention, nombre de plaques théoriques
En plus de la résolution, le facteur de séparation (α) est également utilisé comme indicateur de la séparation de deux pics. Le facteur de séparation est défini comme le rapport des facteurs de rétention (k), comme montré dans l'équation (3).
La résolution peut être exprimée en termes du nombre de plaques théoriques, du facteur de séparation et du facteur de rétention, comme montré dans l'équation (4).
