Séquençage des acides aminés N-terminaux et des anticorps IgG
Récemment, le terme « biomédecine » est souvent utilisé dans le domaine pharmaceutique. Bien qu'ils soient également appelés produits biopharmaceutiques, ils font référence à des médicaments protéiques et à des anticorps développés et fabriqués à l'aide de biotechnologies, notamment la recombinaison génétique, la fusion cellulaire et la culture cellulaire. En revanche, les médicaments conventionnels sont appelés « médicaments de faible poids moléculaire » et sont produits par synthèse chimique. Bien que les deux types soient des composés chimiques, comparés aux médicaments de faible poids moléculaire synthétisés chimiquement, les biomédicaments ont généralement un poids moléculaire beaucoup plus élevé. Parmi les 10 médicaments les plus vendus dans le monde en 2015, sept étaient des biomédicaments.
Les biomédicaments sont très efficaces, ont peu d’effets secondaires et peuvent être utilisés pour traiter un large éventail de maladies. Malheureusement, contrairement aux médicaments de faible poids moléculaire qui étaient jusqu’à présent courants, la production massive de biomédicaments n’est pas possible de la même manière que celle des produits chimiques de synthèse. La production de produits biomédicaux comprend plusieurs processus, notamment la fabrication, le raffinement, la conception de formes posologiques et le stockage. Afin de garantir la qualité des biomédicaments, les influences provenant des matières premières et des processus de fabrication doivent être prises en compte en plus des tests de qualification des produits. Cela signifie que la gestion de la fabrication et de la qualité des médicaments nécessite une approche différente de celle des produits pharmaceutiques de faible poids moléculaire synthétisés chimiquement. Il existe actuellement des lignes directrices pour évaluer la qualité des biomédicaments. Ces lignes directrices exigent qu’une analyse caractéristique soit effectuée et qu’un type d’analyse caractéristique soit le séquençage des acides aminés N-terminaux. Cette analyse est effectuée pour comparer et vérifier la séquence d'acides aminés N-terminale présumée de la séquence du gène avec la séquence d'acides aminés N-terminale du produit biomédical. La technique d'analyse utilisée est la méthode Edman. Cette technique détermine les séquences aminés en clivant séquentiellement les acides aminés à partir de l'extrémité N-terminale des protéines et obtient des séquences d'acides aminés très fiables. Le séquenceur de protéines PPSQTM-51A/53A est un système qui automatise cette technique. Ce système facilite l'identification des séquences aminés à partir de l'extrémité N-terminale des protéines et peptides cibles.
Cet article présente un exemple de séquençage d’acides aminés d’anticorps IgG de souris en utilisant le système isocratique PPSQ-51A/53A Protein Sequencer comme exemple de séquençage d’acides aminés N-terminal de biomédicaments.
Fig. 1 Protocole de séquençage des acides aminés N-terminaux
Fig. 2 Membrane PVDF après électrotransfert
Séquenceur de protéines
Caractéristiques :
Le PPSQ-51A/53A perpétue la tradition consistant à fournir aux chercheurs un séquençage fiable et sensible des protéines N-terminales grâce à la dégradation Edman automatisée. Qu'il s'agisse de passer d'un autre séquenceur ou d'adopter la technique pour la première fois, le logiciel intuitif et le matériel Shimadzu robuste faciliteront le séquençage des protéines dans votre laboratoire.