Détection de l'indice de réfraction (RID)

Les faisceaux lumineux ou rayons qui traversent une substance se réfractent aux frontières de différentes substances, telles que les phases gazeuses ou liquides (Fig.1).
La détection par indice de réfraction est une méthode de détection qui applique le principe de la réfraction de la lumière.
 

Fig.1 Réfraction des Faisceaux Lumineux

La Fig.2 montre un schéma d'un détecteur d'indice de réfraction (RID). La lumière émise par la lampe passe à travers la fente et traverse la cellule de flux sous forme de faisceau parallèle. La lumière transmise par la cellule de flux forme une image de fente sur la photodiode. Le côté échantillon est appelé la cellule d'échantillon, à travers laquelle la phase mobile contenant l'analyte passe en continu. Le côté de référence est appelé la cellule de référence et il est rempli avec la phase mobile.
Lorsque seule la phase mobile s'écoule du côté de l'échantillon, le rayon lumineux voyage droit sans réfraction, et les deux cellules sont remplies avec la même phase mobile. Lorsqu'une substance autre que la phase mobile, c'est-à-dire un analyte, passe à travers la cellule d'échantillon, l'indice de réfraction de la lumière change. Comme les rayons lumineux ne voyagent pas droit mais sont réfractés, l'image de la fente sur la photodiode se déplace légèrement. Le RID peut détecter ce changement d'indice de réfraction.

Dans l'analyse avec le RID, la cellule d'échantillon et la cellule de référence doivent toujours être remplies avec la même phase mobile afin de maintenir une ligne de base stable. Il est essentiel de choisir une élution isocratique comme méthode de distribution de solvant lors de l'utilisation du RID comme détecteur.
 

Fig.2 Schéma du RID

Le RID est connu comme "Détecteur Universel" car il peut détecter tous les composés qui montrent un indice de réfraction différent de celui de la phase mobile en principe. Cette méthode nécessite une séparation de colonne suffisante en raison de la faible sélectivité et sensibilité des composés qui peuvent être détectés. De plus, elle est facilement affectée par les fluctuations de température et les variations de pression de l'environnement. Le RID montre une petite différence de sensibilité selon les composés cibles. Cette caractéristique permet d'obtenir directement une proportion approximative de l'abondance des composants de l'échantillon, de sorte que le RID est couramment utilisé dans l'analyse GPC pour calculer la distribution de poids moléculaire. 

Fig.3 Comparaison des Chromatogrammes dans le Jus d'Orange Commercial
(a) Jus d'Orange Concentré à 100%
(b) Boisson à l'Orange

Ainsi, le RID est souvent utilisé pour analyser les sucres. Alors que l'ELSD est utilisé pour détecter les oligosaccharides car ils nécessitent une élution en gradient.

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