Q : Si je passe au méthanol, les temps de rétention changent-ils ? Est-il possible de continuer à utiliser la même colonne ?

A :

Parce que la capacité d'élution d'une phase mobile méthanol/eau est inférieure à celle d'une phase mobile acétonitrile/eau (sauf dans les cas où la proportion de solvant organique est égale ou très proche de 100 %), si l'acétonitrile est remplacé par du méthanol dans la même proportion, les temps de rétention augmentent. Vous devez d'abord essayer d'utiliser une proportion légèrement plus grande de méthanol (par exemple, si la proportion d'acétonitrile dans la phase mobile est de 60 %, utilisez une proportion de 80 % de méthanol), et ajuster la proportion de sorte que les temps de rétention soient égaux à ceux obtenus avec l'acétonitrile/eau. Notez également que la sélectivité de séparation diffère entre le méthanol et l'acétonitrile et que l'ordre d'élution peut varier selon le composé.
Dans de nombreux cas, vous pouvez probablement utiliser du méthanol avec la même colonne. En particulier, dans le développement de méthodes avec une colonne ODS, une phase mobile acétonitrile/eau est souvent remplacée expérimentalement par une phase mobile méthanol/eau afin de modifier la sélectivité de séparation. Notez les points suivants lors de l'utilisation de méthanol :
 

• Consultez le manuel d'instructions de votre colonne pour vérifier si le méthanol peut être utilisé avec celle-ci.
• Si le méthanol est utilisé à la place de l'acétonitrile, la pression peut augmenter. Délivrez la phase mobile à environ la moitié du débit utilisé en analyse, puis augmentez-le dans la plage de pression maximale de la colonne tout en observant l'effet. Pour être en sécurité, il est préférable de définir "P.Max" pour la pompe. (C'est la pression maximale à laquelle la livraison est possible. La livraison s'arrête si la pression dépasse ce réglage.)