3-4) Bruit de fond causé par la formation ou l'accumulation de bulles à l'intérieur des cellules de détection

Dysfonctionnements de livraison de solvant dus à des bulles formées ou accumulées à l'intérieur de la pompe

Même si l'air dissous dans la bouteille de phase mobile est en dessous du niveau de solubilité saturée, des bulles peuvent encore se former lorsque la solution passe à travers la pompe.

(1) Mélanges à faible pression : Lorsque différents solvants sont mélangés à pression atmosphérique (ou légèrement inférieure), des bulles peuvent se former dans la zone entourée en rouge dans la figure 10, en raison du mécanisme décrit dans 2-3). Peu importe à quel point le mélangeur de gradient est installé en aval (côté haute pression) de la pompe, le mélange commencera dans la zone entourée en rouge, ce qui entraînera un certain degré de formation de bulles. En revanche, dans le mélange de gradients à haute pression, le mélange commence en aval (côté haute pression) de la pompe, donc ce type de problème ne se produit pas.

(2) Obstruction du filtre d'aspiration : Si le filtre d'aspiration devient obstrué, la résistance augmente lors de l'aspiration, ce qui augmente la probabilité de formation de bulles en raison de la chute de pression à l'intérieur du filtre. L'obstruction peut se produire dans des cas tels que lorsque le filtre est laissé inactif et que des matières étrangères s'y adhèrent ou lorsque le méthanol est passé à travers le filtre sans réaliser que la phase mobile précédente était une solution tampon. Si le degré d'obstruction est léger, les bulles d'air peuvent être évitées en dégazant adéquatement la phase mobile, mais c'est en réalité un problème qui doit être résolu par le nettoyage ou le remplacement du filtre.

Les problèmes pouvant être causés par ces facteurs sont les mêmes que ceux décrits dans 3-1).

Comment nettoyer les filtres d'aspiration
Si un filtre d'aspiration devient obstrué par des matières insolubles ou des débris, essayez de le rincer en flux inverse dans un nettoyeur ultrasonique, comme montré dans la figure 11. S'il est obstrué par précipitation de composés, rincez le filtre en changeant les solutions de rinçage, dans l'ordre, de l'eau à la solution A, à l'alcool isopropylique et au chloroforme (où A est une solution d'ammoniaque/méthanol aqueuse diluée dans le cas d'un composé organique acide ou une solution d'acide phosphorique/méthanol aqueuse diluée dans le cas d'un composé organique basique). De plus, utilisez la pompe pour un rinçage complet (figure 12). Même après le rinçage, si des bulles apparaissent dans le tube d'aspiration lors de débits rapides, remplacez le filtre.
Notez qu'une solution d'acide nitrique diluée (ne pas la laisser entrer en contact avec de l'alcool) est souvent utilisée comme solution de rinçage pour les particules métalliques, tandis qu'une solution d'EDTA-2Na aqueuse est souvent utilisée pour les ions métalliques et une solution de SDS aqueuse est souvent utilisée pour les protéines.